Laboratorní příručka

 

 

rádi bychom Vás informovali, že v ÚLM bude rozšířena nabídka vyšetření likvoru a séra o stanovení

pNFH

(fosforylovaných těžkých řetězců neurofilament),

termín zahájení vyšetření: od 1. 1. 2021

 

Metoda: stanovení je prováděno pomocí diagnostické soupravy „Neurofilament (pNf-H)-high sensitive ELISA“ firmy Euroimmun (Německo), kat. č. EQ 6562-9601 certifikované pro diagnostické použití (IVD).

 

Indikace vyšetření:

·       při podezření na diagnózu amyotrofické laterální sklerózy (ALS) – výrazně zvýšené koncentrace mohou tuto diagnózu podpořit

·       při závažném podezření na diagnózu roztroušené sklerózy (RS), popř. pro sledování průběhu onemocnění RS a odpovědi na léčbu DMD – u pacientů s klinicky izolovaným syndromem (CIS) a vysokými koncentracemi neurofilament v likvoru je vyšší riziko konverze do klinicky jisté RS; vyšší koncentrace mohou naznačovat agresívnější průběh onemocnění; snížení koncentrace neurofilament v likvoru a séru koreluje s dobrou odpovědí na léčbu DMD

·       popř. při podezření na poškození axonů jiné etiologie

 

Většina studií týkající se významu stanovení neurofilament vychází z měření lehkých řetězců (NFL) v likvoru nebo séru. Stanovení NFL v likvoru validovanou ELISA soupravou je v nabídce laboratoře již několik let a nadále v nabídce zůstává. Pro stanovení nízkých koncentrací NFL v séru je však t.č. jedinou validovanou metodou digitální ELISA (SiMoA) vyžadující speciální přístroj s extrémně vysokou pořizovací cenou i provozními náklady. Na základě vlastních pozitivních prvních zkušeností se stanovením pNFH v séru cenově dostupnou vysoce senzitivní ELISA metodou usuzujeme, že i tento test je použitelný k průkazu axonálního poškození a monitorování jeho dynamiky v průběhu onemocnění a jeho léčby.

 

Pokyny k odběru:

Likvor – zkumavky firmy Sarstedt s označením likvor (košík č. 0201888), popř. jakékoliv skleněná či plastová zkumavka bez protisrážlivých prostředků. Nelze použít zkumavku s krastenem nebo gelem – znehodnotí to vyšetření buněk.

Krev – standardní zkumavky bez protisrážlivých prostředků (sérum), použití separačních gelů a akcelerátorů srážení je možné.

 

Doba odezvy:

Test bude prováděn s frekvencí 1 x za 3 týdny, popř. podle frekvence požadavků. Alikvoty likvoru a séra jsou ihned po obdržení vzorku centrifugovány a supernatant uchováván zamražený na -30°C do doby provedení analýzy.

 

 

Referenční meze (údaje výrobce)

 

 

Poznámka: Uvedené hodnoty lze aplikovat při indikaci testu pro podezření na diagnózu ALS. U pacientů s RS jsou dle našich prvních zkušeností koncentrace pNFH v likvoru i séru zpravidla nižší. Pro sledování aktivity nemoci a efektu léčby může mít význam sledování dynamiky pNFH v séru.

 

Literatura:

1.     Kušnierová P, Zeman D, Hradílek P, Čábal M, Zapletalová O. Neurofilament levels in patients with neurological diseases: A comparison of neurofilament light and heavy chain levels. Journal of clinical laboratory analysis [online]. 2019, vol. 33, no. 7(e22948), p. 1-8 [cit. 2020-11-05]. ISSN 0887-8013. eISSN 1098-2825.

2.     Kuhle J, Disanto G, Lorscheider J, et al. Fingolimod and CSF neurofilament light chain levels in relapsing‐remitting multiple sclerosis. Neurology. 2015;84(16):1639‐1643.

3.     Neurofilament (pNf‐H) ELISA, Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG (Germany). Version: 20/07/2017.

4.     Neurofilament (pNf‐H)-high sensitive ELISA, Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG (Germany). Version: 2019-08-29.

5.     Arrambide G, Espejo C, Eixarch H, et al. Neurofilament light chain level is a weak risk factor for the development of MS. Neurology. 2016;87(11):1076‐1084.

6.     Lee MK, Cleveland DW. Neuronal intermediate filaments. Annu Rev Neurosci. 1996;19:187‐217.

7.     De Schaepdryver M, Jeromin A, Gille B, et al. Comparison of elevated phosphorylated neurofilament heavy chains in serum and cerebrospinal fluid of patients with amyotrophic lateral sclerosis. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2018;89(4):367‐373.

8.     Disanto G, Adiutori R, Dobson R, et al. Serum neurofilament light chain levels are increased in patients with a clinically isolated syndrome. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2016;87(2):126‐129.

9.     Siller N, Kuhle J, Muthuraman M, et al. Serum neurofilament light chain is a biomarker of acute and chronic neuronal damage in early multiple sclerosis. Mult Scler. 2019;25(5):678‐686.Petzold A. Neurofilament phosphoforms: Surrogate markers for axonal injury, degeneration and loss. J Neurol Sci 2005; 233: 183-98.

10.  Gresle MM, Liu Y, Dagley LF et al. Serum phosphorylated neurofilament-heavy chain levels in multiple sclerosis patients. J Neurol Neurosurg Psychiatry 2014; 85: 1209-13.Teunissen CE, Khalil M. Neurofilaments as biomarkers in multiple sclerosis. Mult Scler 2012; 18: 552-6.

 

S pozdravem

 

RNDr. Pavlína Kušnierová, Ph.D.                                               MUDr. Ing. David Zeman, Ph.D.

VŠ Úseku analýzy likvoru                                                           Úsek analýzy likvoru

tel.: 59 737 4144                                                                         tel.: 59 737 4129

 

RNDr. Zdeněk Švagera, Ph.D.                                               prof. MUDr. David Stejskal, Ph.D., MBA

Primář OKB                                                                           Přednosta ÚLD

tel.: 59 737 4121                                                                        tel.: 59 737 4646